Propòsit i passos involucrats en una prova de cariotip
Si el vostre metge li ha recomanat una prova de cariotip per a vostè o el seu fill o després d'una amniocentesi, què implica aquesta prova? Quines condicions pot diagnosticar un cariotip, quins són els passos implicats en fer les proves i quines són les seves limitacions?
Què és una prova de cariotip?
Un cariotip és una fotografia dels cromosomes en una cèl·lula . Els cariotips es poden extreure de les cèl·lules de la sang, de les cèl·lules de la pell fetal (de líquid amniòtic o de la placenta) o de cèl·lules de medul·la òssia.
Quines condicions es poden diagnosticar amb una prova de cariotip?
Els cariotips es poden utilitzar per a la detecció i la confirmació d'anomalies cromosòmiques, com ara la síndrome de Down, i hi ha diversos tipus d'anormalitats que es poden detectar.
Una d'aquestes és la trisomia en què hi ha tres còpies d'un dels cromosomes en lloc de dos. En canvi, les monosomies es produeixen quan només hi ha una còpia (en comptes de dues). A més de les trisomies i les monosomies, hi ha eliminacions cromosòmiques en què falta una part d'un cromosoma i translocacions cromosòmiques, en què una part d'un cromosoma s'adjunta a un altre cromosoma (i viceversa en translocacions equilibrades).
Alguns exemples de trisomies són:
- Síndrome de Down (trisomia 21)
- Síndrome d'Edward ( trisomia 18 )
- Síndrome de Patau (trisomia 13)
- Síndrome de Klinefelter (XXY i altres variacions): la síndrome de Klinefelter es presenta en 1 de cada 500 homes nounats i sembla que augmenta en la incidència.
- Síndrome triple X (XXX)
Un exemple d'una monosomia inclou:
- La síndrome de Turner (X0) o la monosomia X: aproximadament un 15% dels avortaments involucrats es deuen a la síndrome de Turner, però aquesta trisomia està present en només al voltant d'1 del 2000 nascuts vius
Alguns exemples de supressions cromosòmiques inclouen:
- Síndrome de Cri-du-Chat (cromosoma 5 faltat)
- Síndrome de Williams (cromosoma 7 faltat)
Translocacions: hi ha molts exemples de translocacions que inclouen la translocació de la síndrome de Down. Les translocacions de Robertsonian són bastant comuns, i es produeixen en aproximadament 1 de cada 1000 persones.
El mosaicisme és una condició en què algunes cèl·lules del cos tenen una anomalia cromosòmica mentre que altres no. Per exemple, la síndrome de mosaic Down o la trisomia del mosaic 9. La trisomia completa 9 no és compatible amb la vida, però la trisomia 9 del mosaic pot donar lloc a un naixement viu.
(Un exemple val més que mil paraules. Coneixeu les diferències entre la translocació, la trisomia i el mosaic de la síndrome de Down ).
Quan es fa un cariotip?
Hi ha moltes situacions en què un metge pot recomanar un cariotip. Aquests poden incloure:
- Infants o nens amb condicions mèdiques que suggereixen una anomalia cromosòmica que encara no s'ha diagnosticat.
- Els adults que presenten símptomes suggestius d'anomalia cromosòmica (per exemple, els homes amb malaltia de Klinefelter poden no ser diagnosticats fins a la pubertat o l'edat adulta). Alguns dels trastorns de la trisomia del mosaic també poden no ser diagnosticats.
- Infertilitat: es pot fer un cariotip genètic per a la infertilitat. Com es va assenyalar anteriorment, algunes anomalies cromosòmiques poden no ser diagnosticades fins a l'edat adulta. Una dona amb síndrome de Turner o un home amb alguna de les variants de Klinefelter pot no estar al corrent de la malaltia fins que estiguin subjectes a la infertilitat.
- Exàmens prenatals: en alguns casos, com la translocació de la síndrome de Down, la condició pot ser hereditària i els pares poden ser provats si un nen ha nascut amb una síndrome de Down. (És important tenir en compte que la major part del temps la síndrome de Down no és un trastorn hereditari sinó una mutació de la casualitat).
- Stillbirth: sovint es fa un cariotip com a part de les proves posteriors a un fet mortal.
- Els avortaments recurrents: un cariotip parental d'avortaments recurrents pot donar pistes sobre els motius d'aquestes devastadores pèrdues recurrents. Es pensa que les anomalies cromosòmiques, com la trisomia 16, són la causa d'un mínim del 50 per cent dels avortaments.
- Leucèmia: també es poden fer proves de cariotip per ajudar a diagnosticar les leucèmies, per exemple, buscant el cromosoma de Filadèlfia que es troba en algunes persones amb leucèmia mielògena crònica o leucèmia limfàtica aguda.
Passos involucrats en una prova de cariotip
Una prova de cariotip pot semblar una prova de sang senzilla, la qual cosa fa que moltes persones es preguntin per què triguen tant a obtenir els resultats. Aquesta prova és bastant complexa després de la recollida. Fem una ullada a aquests passos perquè pugueu entendre què passa durant el temps que espera la prova.
1. Col.lecció de mostres
El primer pas per realitzar un cariotip és recollir una mostra. En els nounats es recull una mostra de sang que conté glòbuls vermells, glòbuls blancs, sèrum i altres fluids. Es realitzarà un cariotip en els glòbuls blancs que es divideixen activament (un estat anomenat mitosi). Durant l'embaràs, la mostra pot ser un líquid amniòtic recollit durant una amniocentesi o una peça de la placenta recollida durant una prova de mostreig de vellosis coriónica (CVS). El líquid amniòtic conté cèl·lules de la pell fetal que s'utilitzen per generar un cariotip.
2. Transport al laboratori
Els cariotips es realitzen en un laboratori específic anomenat laboratori de citogenètica, un laboratori que estudia els cromosomes. No tots els hospitals tenen laboratoris de citogenètica. Si el vostre hospital o centre mèdic no disposa del seu propi laboratori de citogenètica, la mostra de prova s'enviarà a un laboratori especialitzat en anàlisis de cariotip. La mostra de prova s'analitza mitjançant tecnòlegs citogenètics especialment formats, Ph.D. citogenètics o genetistes mèdics.
3. Separació de les cèl·lules
Per analitzar els cromosomes, la mostra ha de contenir cèl·lules que es divideixen activament. A la sang, els glòbuls blancs es divideixen activament. La majoria de cèl·lules fetals també es divideixen activament. Una vegada que la mostra arriba al laboratori de citogenètica, les cèl·lules no dividides es separen de les cel·les divisòries amb productes químics especials.
4. Cèl·lules en creixement
Per disposar de cèl·lules suficients per analitzar, les cèl·lules divisòries es conreen en mitjans especials o en un cultiu cel·lular. Aquest mitjà conté productes químics i hormones que permeten que les cèl·lules es divideixin i es multipliquin. Aquest procés de cultivo pot trigar entre tres i quatre dies per les cèl·lules sanguínies i fins a una setmana per a les cèl·lules fetals.
5. Sincronització de les cel·les
Els cromosomes són una cadena llarga d'ADN humà. Per veure els cromosomes sota un microscopi, els cromosomes han d'estar en la seva forma més compacta en una fase de divisió cel·lular (mitosi) coneguda com a metafase. Per tal d'obtenir totes les cèl·lules en aquesta etapa específica de la divisió cel·lular, les cèl·lules es tracten amb una substància química que atura la divisió cel·lular en el punt on els cromosomes són els més compactes.
6. Alliberament dels cromosomes de les seves cèl·lules
Per veure aquests cromosomes compactes sota un microscopi, els cromosomes han de quedar fora dels glòbuls blancs. Això es fa tractant els glòbuls blancs amb una solució especial que els fa explotar. Això es fa mentre les cel·les estan en una diapositiva microscòpica. Les escombraries sobrants dels glòbuls blancs es retiren, deixant els cromosomes enganxats a la corredissa.
7. Tinteig dels cromosomes
Els cromosomes són naturalment incolors. Per explicar un cromosoma d'un altre, s'aplica a la diapositiva un tint especial anomenat tints Giemsa. El tint de Giemsa talla regions de cromosomes que són rics en les bases adenina (A) i timina (T). Quan estan tacats, els cromosomes es veuen com cadenes amb bandes clares i fosques. Cada cromosoma té un patró específic de bandes lleugeres i fosques que permeten al citoogenetic dir un cromosoma d'un altre. Cada banda fosca o lleugera engloba centenars de diferents gens.
8. Anàlisi
Una vegada que els cromosomes estan tacats, la diapositiva es posa sota el microscopi per a l'anàlisi. Es pren una imatge dels cromosomes. Al final de l'anàlisi, es determinarà el nombre total de cromosomes i es classificaran els cromosomes segons la mida.
9. Comptar els cromosomes
El primer pas de l'anàlisi és comptar els cromosomes. La majoria dels humans tenen 46 cromosomes. Les persones amb síndrome de Down tenen 47 cromosomes. També és possible que la gent tingui cromosomes desapareguts, més d'un cromosoma extra o una porció d'un cromosoma que no es troba o es dupliqui. Si observem només el nombre de cromosomes, és possible diagnosticar diferents condicions, inclosa la síndrome de Down.
10. Classificació dels cromosomes
Després de determinar el nombre de cromosomes, el citogenetista començarà a ordenar els cromosomes. Per ordenar els cromosomes, un citogenetista compara la longitud del cromosoma, la col·locació de centròmers (les zones on s'uneixen les dues cromàtides) i la ubicació i la mida de les bandes G. Els parells de cromosomes es numeren del més gran (nombre 1) al més petit (número 22). Hi ha 22 parells de cromosomes, anomenats autosomes, que coincideixen exactament. També hi ha els cromosomes sexuals, les femelles tenen dos cromosomes X, mentre que els mascles tenen una X i una Y.
11. Mirant l'Estructura
A més de mirar el nombre total de cromosomes i els cromosomes sexuals, el citoxenetista també analitzarà l'estructura dels cromosomes específics per assegurar-se que no hi hagi materials faltants o addicionals, així com anomalies estructurals com translocacions. Una translocació es produeix quan una part d'un cromosoma s'adjunta a un altre cromosoma. En alguns casos, s'intercanvien dos peces de cromosomes (una translocació equilibrada) i altres vegades s'afegeix o falla una peça extra d'un sol cromosoma.
12. El resultat final
Al final, el cariotip final mostra el nombre total de cromosomes, el sexe i qualsevol anormalitat estructural amb cromosomes individuals. Es genera una imatge digital dels cromosomes amb tots els cromosomes ordenats per nombre.
Límits de proves de cariotip
És important tenir en compte que, si bé les proves de cariotip poden donar molta informació sobre cromosomes, aquesta prova no pot dir si estan presents mutacions genètiques específiques, com les que causen fibrosi quística . El vostre conseller genètic us pot ajudar a comprendre quines proves de cariotip us poden dir i què no poden fer. Es necessiten estudis addicionals per avaluar el possible paper de les mutacions genètiques en malalties o avortament involuntari.
També és important tenir en compte que, de vegades, les proves de cariotip no poden detectar algunes anomalies cromosòmiques, com quan el mosaicisme placentari està present.
El futur
En l'actualitat, les proves de cariotip a l'entorn prenatal són bastant invasives, que requereixen amniocentesi o mostres de vellositat coriónica. S'estan estudiant avaluacions d'ADN lliure de cèl·lules en la mostra de sang d'una mare com una alternativa molt menys invasiva per al diagnòstic prenatal d'anomalies genètiques en un fetus.
Inferior a l'espera dels resultats del cariotip
Mentre espera els resultats del cariotip, potser se senti molt ansiós i la setmana o dues que trigui a obtenir resultats pot sentir-se eons. Preneu-vos el temps per recolzar-se als vostres amics i familiars. Aprendre sobre algunes de les condicions associades amb cromosomes anormals també pot ser útil. Encara que moltes de les condicions diagnosticades amb un cariotip poden ser devastadores, hi ha moltes persones que viuen amb aquestes condicions que tenen una excel·lent qualitat de vida.
> Fonts
- > Kumar, Vinay, Abul K. Abbas i Jon C. Aster. Robbins i Cotran Fonaments patològics de la malaltia. Filadèlfia: Elsevier-Saunders, 2015. Impressió.
- > Norton, M., i B. Rink. Canviar indicacions per a proves invasives en una era de projecció millorada. Seminaris en Perinatologia . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J., i R. Lathi. Comparació de citogenètica i cariotip automàtic molecular per a assaigs cromosòmics d'espècimens d'avortament involuntari. Fertilitat i esterilitat . 2017. 107 (4): 1028-1033.