Fluorescència In situ Hibridació
La hibridació in situ de fluorescència (FISH) és una de les diverses tècniques utilitzades per buscar l'ADN de les cèl · lules, buscant la presència o absència de gens o porcions específics de gens.
Molts tipus diferents de càncer s'associen amb anomalies genètiques conegudes. I per genètica, no només parlem d'herència. Durant tota la vida, les cèl·lules poden cometre errors quan es divideixen i creixen.
Les mutacions en el DNA associades al càncer es poden acumular en aquestes cèl·lules.
Com funciona FISH?
FISH és una tècnica que utilitza sondes fluorescents per detectar gens específics o parts de gens (seqüències d'ADN). El personal de laboratori del centre mèdic i els oncòlegs utilitzen FISH per ajudar a avaluar pacients que pateixen càncer i, de vegades, controlar un pacient que ja ha estat diagnosticat de càncer i tractat.
El PEIX es pot fer usant diversos tipus de mostres segons la localització i el tipus de càncer sospitós: cèl·lules tumorals obtingudes de sang perifèrica, d'una biòpsia de medul·la òssia o d'una biòpsia de ganglis limfàtics i formalina de teixit fix en parafina fix (es refereix a una mostra de teixit que es processa al laboratori i s'inscriu en un tipus de cera, fent-lo més rígid, de manera que es pugui tallar en seccions primes i muntar per veure-les sota el microscopi).
Què vol dir les lletres?
La "H" de FISH fa referència a la hibridació.
En hibridació molecular, s'utilitza una seqüència d'ADN o RNA etiquetada com a sonda: visualitzeu un maó Lego vermell, si ho voleu. La sonda s'utilitza per trobar una contrapartida de maó Lego, o seqüència d'ADN, en una mostra biològica.
L'ADN en el vostre espècimen és com piles de maons Lego, i la majoria dels maons d'aquestes piles no coincideixen amb la nostra sonda vermella.
I tots els vostres maons estan ordenats en 23 parells de piles de maó: cada pila és un dels vostres cromosomes homòlegs emparellats, més o menys. A diferència dels maons Lego, la nostra sonda vermella Lego és com un imant fort i troba la seva coincidència sense haver d'ordenar les pilotes.
La "F" fa referència a la fluorescència. La nostra sonda vermella es pot perdre a les piles de maons, de manera que està etiquetada amb tint color fluorescents perquè resplendeixi. Quan troba la seva coincidència entre les 23 piles emparejades, una etiqueta fluorescent revela la seva ubicació. Així doncs, ara podeu veure com els investigadors i els clínics podrien utilitzar FISH per ajudar a identificar on (quina pila o quin cromosoma) es troba un gen en particular per a un determinat individu.
El "I" i el "S" es presenten in situ . Això es refereix al fet que el nostre maó Lego vermell està buscant la seva coincidència dins de la mostra que vau donar .
Què passa amb els càncer de sang específics?
FISH i altres procediments d'hibridació in situ s'utilitzen per diagnosticar una varietat d'anomalies cromosòmiques: canvis en el material genètic, canvis en els cromosomes, inclosos els següents:
Supressió : la part d'un cromosoma ha desaparegut
Traslocació : part d'un cromosoma es trenca i s'adhereix a un altre cromosoma
Inversió : part d'un cromosoma es trenca i torna a inserir, però en ordre invers
Duplicació : part d'un cromosoma està present en massa còpies dins de la cel·la
Cada tipus de càncer pot tenir el seu propi conjunt de canvis cromosòmics i sondes rellevants. FISH no només ajuda a identificar els canvis genètics inicials en un procés de malaltia com el càncer, sinó que també es pot utilitzar per supervisar la resposta a la teràpia i la remissió de la malaltia.
Els canvis genètics detectats per FISH a vegades ofereixen informació addicional sobre com es pot comportar el càncer d'un individu, d'acord amb el que s'ha observat en el passat en persones amb el mateix tipus de càncer i canvis genètics similars. De vegades s'utilitza FISH després d'haver realitzat el diagnòstic, per obtenir informació addicional que podria ajudar a predir el resultat o millor tractament d'un pacient.
FISH pot identificar anomalies cromosòmiques en leucèmies , incloent-hi la leucèmia limfàtica crònica (CLL). Per a la leucèmia limfocítica crònica o el limfoma limfocític petit, FISH permet als pacients conèixer la seva categoria pronòstica: bona, mitjana o pobra. En la leucèmia limfoblàstica aguda (ALL), la genètica de les cèl·lules leucèmiques pot explicar sobre el nivell de risc de càncer i ajudar a guiar les decisions terapèutiques.
També hi ha panells de peix per al limfoma, mieloma múltiple, trastorns proliferatius de cèl·lules plasmàtiques i síndrome mielodisplàsic. En el cas del limfoma de cèl·lules de mantell, per exemple, hi ha una translocació que FISH pot detectar anomenat GH / CCND1 t (11; 14) que sovint s'associa amb aquest limfoma.
Per què FISH?
Un avantatge de FISH és que no s'ha de realitzar en cèl·lules que es divideixen activament. Les proves citogenètiques solen trigar unes tres setmanes, perquè les cèl·lules canceroses han de créixer en plats de laboratori durant unes 2 setmanes abans que puguin ser provats. En canvi, els resultats de FISH solen estar disponibles al laboratori en pocs dies.
> Fonts:
> Codis CPT de proves citogenètiques de càncer.
> Fluorescència hibridació in situ (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluorescència hibridació in situ (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Orientació per a proves d'hibridació en situacions de fluorescència en trastorns hematològics. The Journal of Molecular Diagnostics: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.